APLP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406400

Panoramica

APLP2 (proteina 2 simile al precursore della beta-amiloide) è una glicoproteina transmembrana di tipo I della famiglia APP che va incontro a processamento proteolitico e partecipa al traffico delle proteine di membrana, all’adesione cellulare e alla segnalazione cellula-cellula. Si localizza in compartimenti secretori ed endocitici ed è stata collegata alla regolazione dell’endocitosi, a processi di sviluppo sinaptico e neuronale e a vie della proteostasi. APLP2 può modulare le interazioni con componenti della matrice extracellulare e con proteine adattatrici intracellulari, influenzando l’organizzazione del citoscheletro e il turnover dei recettori. Alterazioni della biologia della famiglia APP, inclusi espressione e processamento di APLP2, vengono studiate in contesti quali la neurobiologia e i fenotipi delle cellule tumorali, in cui sono rilevanti cambiamenti in adesione, migrazione e segnalazione per la sopravvivenza.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO APLP2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene APLP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del APLP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto APLP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina APLP2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di APLP2 per lo studio della segnalazione di APLP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni APLP2 critici per la funzione di APLP2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di APLP2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal APLP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal APLP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus APLP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal APLP2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR APLP2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia APLP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio APLP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.