AP-1μ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404512-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AP-1μ2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AP-1μ2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AP-1μ2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AP1M2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AP-1μ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404512-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AP-1μ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404512-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AP1M2 codifica a subunidade μ2 do complexo de proteínas adaptadoras 1 (AP-1), um componente central na formação de vesículas revestidas por clatrina na rede trans-Golgi e em endossomos. A AP-1μ2 contribui para a seleção de carga ao reconhecer motivos de endereçamento nas caudas citosólicas de proteínas transmembrana, ajudando a direcionar receptores e enzimas pela rede de tráfego secretor e endolisossomal. Por meio dessas funções, a AP-1μ2 sustenta a homeostase de proteínas de membrana, a reciclagem de receptores e processos de tráfego polarizado que moldam a saída de sinalização e a composição de organelas. A disrupção do endereçamento mediado por complexos adaptadores é amplamente relevante para estudos de neurodesenvolvimento, sinalização imune e biologia do câncer, nos quais alterações no tráfego vesicular podem influenciar a abundância de receptores de fatores de crescimento e a ativação de vias a jusante.
AP-1μ2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AP1M2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AP1M2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AP1M2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AP1M2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.