ALPPL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401492-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALPPL2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ALPPL2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ALPPL2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ALPPL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ALPPL2 Anticorpo (9-YD35): sc-134255
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALPPL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401492-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ALPPL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401492-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALPPL2 (fosfatase alcalina, tipo placentário 2) codifica uma ectoenzima ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI) da família das fosfatases alcalinas, que hidrolisa monoésteres fosfato extracelulares e pode influenciar a disponibilidade local de fosfato. Como proteína de superfície celular, a ALPPL2 está posicionada para modular o metabolismo pericelular de nucleotídeos/fosfato, a sinalização em microdomínios de membrana e processos associados à diferenciação. Sua expressão é frequentemente investigada como um marcador de linhagem ou associado a tumores em contextos epiteliais, nos quais alterações na atividade de fosfatase alcalina e na apresentação de antígenos de superfície podem acompanhar mudanças na proliferação e no estado celular. Essas características tornam a ALPPL2 relevante para estudos mecanísticos de identidade celular, função de enzimas de membrana e programas de expressão associados a doenças.
ALPPL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ALPPL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ALPPL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ALPPL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ALPPL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.