ALPPL2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401492-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ALPPL2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ALPPL2 Double Nickase Plasmid (h) e il ALPPL2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ALPPL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ALPPL2 Antibody (9-YD35): sc-134255
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ALPPL2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401492-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ALPPL2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401492-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALPPL2 (fosfatasi alcalina, simil-placentare 2) codifica un ectoenzima ancorato tramite glicosilfosfatidilinositolo (GPI) della famiglia delle fosfatasi alcaline, che idrolizza monoesteri fosfatici extracellulari e può influenzare la disponibilità locale di fosfato. In quanto proteina di membrana, ALPPL2 è in posizione ideale per modulare il metabolismo pericellulare di nucleotidi/fosfati, la segnalazione nei microdomini di membrana e processi associati alla differenziazione. La sua espressione viene spesso studiata come marcatore di linea cellulare o associato a tumori in contesti epiteliali, dove alterazioni dell’attività della fosfatasi alcalina e della presentazione di antigeni di superficie possono accompagnare cambiamenti nella proliferazione e nello stato cellulare. Queste caratteristiche rendono ALPPL2 rilevante per studi meccanicistici sull’identità cellulare, sulla funzione degli enzimi di membrana e su programmi di espressione associati a patologie.
ALPPL2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ALPPL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ALPPL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ALPPL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ALPPL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.