Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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alpha Synuclein Plasmide Double Nickase (h): sc-417273-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- alpha Synuclein Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il alpha Synuclein Double Nickase Plasmid (h) e il alpha Synuclein Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SNCA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: alpha Synuclein Antibody (211): sc-12767
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
alpha Synuclein Plasmide Double Nickase (h) | sc-417273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
alpha Synuclein Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SNCA umano codifica l’alfa-sinucleina, una proteina presinaptica che regola il traffico delle vescicole sinaptiche, il rilascio di neurotrasmettitori e le interazioni con i lipidi di membrana nei neuroni. Partecipa a reti di proteostasi che includono le vie ubiquitina–proteasoma e autofagia–lisosoma, e le sue dinamiche conformazionali influenzano l’oligomerizzazione e i processi di aggregazione. Una biologia dell’alfa-sinucleina deregolata è fortemente associata alla patologia dei corpi di Lewy e a meccanismi neurodegenerativi che includono disfunzione sinaptica, stress mitocondriale e neuroinfiammazione. Queste caratteristiche rendono SNCA un bersaglio centrale per lo studio dell’omeostasi neuronale, delle vie di aggregazione proteica e delle relazioni genotipo-fenotipo in modelli di neuroscienze cellulari e molecolari.
alpha Synuclein Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SNCA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SNCA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SNCA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SNCA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.