ACAD-9 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432841-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACAD-9O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACAD-9 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ACAD-9 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Acad9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACAD-9 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432841-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACAD-9 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-432841-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Acad9 codifica a ACAD-9, uma flavoproteína mitocondrial que atua como uma acil-CoA desidrogenase na β-oxidação de ácidos graxos e também dá suporte à fosforilação oxidativa por meio de funções ligadas à montagem e à estabilidade do complexo I (NADH:ubiquinona oxidoredutase). Ao acoplar o fluxo de elétrons derivado de lipídios à função da cadeia respiratória, a ACAD-9 contribui para o equilíbrio redox mitocondrial, a produção de ATP e a adaptação metabólica em tecidos com alta demanda energética. A disfunção da atividade da ACAD-9 está associada à respiração mitocondrial prejudicada, a perfis alterados de acilcarnitinas e ao estresse bioenergético celular, tornando Acad9 um alvo relevante para estudos dos mecanismos de doenças mitocondriais. Em modelos murinos e sistemas celulares, a perturbação de Acad9 permite investigar o remodelamento metabólico, o manejo de EROs (espécies reativas de oxigênio) e as vias de sinalização mito-nuclear sob condições de utilização de ácidos graxos e restrição da cadeia respiratória.
ACAD-9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Acad9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Acad9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Acad9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Acad9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.