3β-HSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400991-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- 3β-HSD2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase 3β-HSD2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase 3β-HSD2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSD3B2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
3β-HSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400991-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
3β-HSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400991-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSD3B2 codifica a 3β-hidroxiesteroide desidrogenase humana tipo 2 (3β-HSD2), uma enzima dependente de NAD⁺ que catalisa a conversão oxidativa de Δ5-3β-hidroxiesteroides em Δ4-cetoesteroides, uma etapa-chave na esteroidogênese. Essa atividade sustenta a biossíntese adrenal e gonadal de progesterona, androstenediona e precursores relacionados, necessários às vias de glicocorticoides, mineralocorticoides e esteroides sexuais. A função da 3β-HSD2 está intimamente ligada às redes esteroidogênicas mitocondriais e do retículo endoplasmático e à sinalização de feedback endócrino. Alterações na atividade ou na expressão de HSD3B2 têm sido associadas a erros inatos da biossíntese de esteroides e a fenótipos de desequilíbrio esteroidal, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da biologia adrenal e reprodutiva.
3β-HSD2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSD3B2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSD3B2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSD3B2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSD3B2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.