Plásmido Doble Nickase (h) α-parvin: sc-405769-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)α-parvin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa α-parvin (h) y el plásmido de doble nickasa α-parvin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PARVA. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) α-parvin | sc-405769-NIC | 20 µg | $410.00 |
PARVA codifica la α-parvina, una proteína de adhesión focal de unión a actina que se asocia con la quinasa ligada a integrinas (ILK) y PINCH para formar el complejo IPP, acoplando la señalización mediada por integrinas con la remodelación del citoesqueleto. A través de interacciones con paxilina, actina y componentes de las adhesiones focales, la α-parvina regula la adhesión celular, el extendido (spreading), la migración y la mecanotransducción, influyendo en vías que controlan la forma celular y la organización tisular. La dinámica de adhesión dependiente de PARVA es relevante para procesos como la angiogénesis y la detección de la matriz extracelular, y en la literatura se ha vinculado la alteración de su expresión o regulación con la invasión de células cancerosas y fenotipos asociados a la metástasis. Como adaptador citoesquelético en sitios de adhesión, la α-parvina ofrece un punto de entrada útil para estudiar la señalización mediada por integrinas y la arquitectura de actina en células humanas.
α-parvin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PARVA en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PARVA. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PARVA. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PARVA alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.