ZSWIM8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411661

概要

ZSWIM8（zinc finger SWIM-type containing 8）は、Cullin-RING型ユビキチン化複合体において基質アダプターとして機能するE3ユビキチンリガーゼ構成因子をコードし、核および細胞質におけるタンパク質ターンオーバーの制御に寄与します。ZSWIM8の重要な役割の一つは小分子RNAの品質管理であり、標的指向性マイクロRNA分解（TDMD）を促進することでmiRNA量と、それに続く転写後遺伝子制御を調整します。これらの機構を介して、ZSWIM8は細胞状態の遷移、発生プログラム、ストレス応答性の転写ネットワークに関連する経路に影響を与えます。ZSWIM8活性の変化に伴う、ユビキチン介在性プロテオスタシスおよびmiRNA恒常性の破綻は、がん生物学や神経発達表現型に関連する文脈で研究されています。

ZSWIM8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZSWIM8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZSWIM8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZSWIM8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZSWIM8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZSWIM8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZSWIM8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZSWIM8の機能に不可欠なZSWIM8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZSWIM8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZSWIM8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZSWIM8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZSWIM8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZSWIM8 HDRプラスミド（h）および ZSWIM8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZSWIM8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZSWIM8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。