ZNF263 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411418-NIC

ZNF263 codifica um fator de transcrição com dedos de zinco C2H2 contendo um domínio KRAB, que se liga a motivos específicos de DNA para regular programas de expressão gênica associados à organização da cromatina e à repressão transcricional. Por meio de interações com a maquinaria correpressora associada ao KRAB e com modificadores epigenéticos, o ZNF263 contribui para o controle da atividade de promotores e enhancers, influenciando a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a estabilidade do genoma. Alterações na atividade do ZNF263 ou expressão desregulada têm sido associadas à reprogramação transcricional observada em diversos contextos de doença, incluindo vias relacionadas ao câncer e regulação do desenvolvimento aberrante. Como regulador dependente de sequência, o ZNF263 é frequentemente investigado para mapear redes regulatórias, identificar alvos genômicos diretos e estudar mecanismos de controle epigenético.

ZNF263 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZNF263 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZNF263. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZNF263. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZNF263 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.