Plasmide Double Nickase (h) ZNF136: sc-411093-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZNF136 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZNF136 Double Nickase (h) et le plasmide ZNF136 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNF136. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ZNF136 Antibody (ZNF1H5D11): sc-81133
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZNF136 | sc-411093-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZNF136 | sc-411093-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF136 code une protéine à doigts de zinc C2H2 contenant un domaine KRAB, impliquée dans la liaison à l’ADN de manière spécifique de la séquence et dans la répression transcriptionnelle via le recrutement de complexes corépresseurs. En tant que composant de réseaux régulateurs à doigts de zinc, ZNF136 devrait influencer l’état de la chromatine et les programmes d’expression génique qui coordonnent la différenciation cellulaire, la prolifération et la transcription en réponse au stress. La dérégulation du silençage médié par les KRAB-ZNF a été associée à une altération du contrôle épigénétique et à une augmentation du bruit transcriptionnel dans divers contextes pathologiques, ce qui fait de ZNF136 une cible d’intérêt pour l’étude de la stabilité de la régulation génique. L’étude fonctionnelle de ZNF136 soutient les travaux mécanistiques sur le contrôle transcriptionnel, les voies associées à la chromatine et les effets en aval sur des phénotypes cellulaires pertinents pour la recherche biomédicale.
ZNF136 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF136 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF136. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF136. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF136.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.