ZIP10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406811

Übersicht

SLC39A10 kodiert ZIP10, einen Zink-Influx-Transporter der Plasmamembran aus der SLC39/ZIP-Familie, der die Verfügbarkeit von cytosolischem Zn2+ für die Aktivität von Metalloenzymen, Zinkfinger-Transkriptionsfaktoren und redoxsensitives Signaling reguliert. Durch die Kontrolle der Zinkhomöostase beeinflusst ZIP10 Signalwege, die mit Zellproliferation, Differenzierung und Stressantworten verknüpft sind, einschließlich Signalkaskaden, die durch eine zinkabhängige Modulation der Aktivitäten von Kinasen und Phosphatasen geprägt werden. Eine veränderte ZIP10-Expression oder Zinkhandhabung wurde in der Literatur mit der Funktion von Immunzellen, der Epithelbiologie und tumorassoziierten Phänotypen in Verbindung gebracht, was die breite Abhängigkeit zellulärer Programme von der Zinkverfügbarkeit widerspiegelt. Diese Eigenschaften machen SLC39A10 zu einem relevanten Ziel für mechanistische Studien zinkregulierter Signalnetzwerke und der Biologie des Metallionentransports.

Das ZIP10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC39A10-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC39A10-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC39A10 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ZIP10-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC39A10-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ZIP10-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC39A10-Exone abzielen, die für die ZIP10-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC39A10-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ZIP10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ZIP10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC39A10-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ZIP10 HDR-Plasmid (h) und ZIP10 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC39A10-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC39A10-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.