ZC3H7A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412020

Descripción general

ZC3H7A (zinc finger CCCH-type containing 7A) codifica una proteína de unión a ARN caracterizada por motivos de dedo de zinc tipo CCCH y participa en la regulación génica postranscripcional. Se ha implicado en la coordinación de la estabilidad y la traducción del ARNm mediante interacciones con complejos ribonucleoproteicos, favoreciendo el control adecuado de los programas de expresión génica durante las respuestas al estrés celular y la proliferación. ZC3H7A también se ha vinculado a redes de interacción virus–huésped, en las que la modulación del metabolismo del ARN puede influir en la señalización inmunitaria innata y en la replicación del patógeno. El procesamiento del ARN desregulado y la traducción adaptativa al estrés son características recurrentes del cáncer y de los trastornos inflamatorios, lo que convierte a ZC3H7A en un nodo útil para estudios mecanísticos de vías reguladoras centradas en el ARN.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZC3H7A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZC3H7A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZC3H7A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZC3H7A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZC3H7A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZC3H7A para la investigación de la señalización de ZC3H7A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ZC3H7A críticos para la función de ZC3H7A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZC3H7A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZC3H7A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZC3H7A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZC3H7A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZC3H7A (h) y el plásmido HDR ZC3H7A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZC3H7A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZC3H7A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.