Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ZBTB4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404975
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ZBTB4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ZBTB4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZBTB4 Anticuerpo (A-7): sc-514883
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ZBTB4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404975 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ZBTB4 (proteína 4 con dedos de zinc y dominio BTB) es un regulador transcripcional específico de secuencia que se une al ADN CpG metilado y contribuye al control epigenético de la expresión génica. A través de su dominio BTB/POZ y sus motivos de dedos de zinc, ZBTB4 participa en programas de represión asociados a la cromatina que influyen en la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño en el ADN y estados transcripcionales vinculados a la diferenciación. La expresión o actividad alterada de ZBTB4 se ha asociado con proliferación desregulada y fenotipos invasivos en múltiples contextos de cáncer, en consonancia con un papel en el mantenimiento de la homeostasis transcripcional. Como factor sensible a la metilación, ZBTB4 también es relevante para estudios que conectan los patrones de metilación del ADN con las salidas transcripcionales posteriores y la estabilidad del genoma.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZBTB4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZBTB4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZBTB4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZBTB4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZBTB4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZBTB4 para la investigación de la señalización de ZBTB4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ZBTB4 críticos para la función de ZBTB4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZBTB4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ZBTB4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZBTB4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZBTB4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZBTB4 (h) y el plásmido HDR ZBTB4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZBTB4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZBTB4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.