YME1L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409793

概要

YME1L1 は、ミトコンドリア内膜に埋め込まれたミトコンドリア局在性の i-AAA 型 ATP 依存性メタロプロテアーゼをコードしており、膜タンパク質の品質管理を担うとともに、呼吸鎖の完全性維持に寄与します。ATP 加水分解をタンパク質分解に共役させることで、YME1L1 はミトコンドリアのプロテオスタシス、オルガネラ形態、ならびにストレス適応を制御し、膜間腔側に向いたドメイン内のミスフォールドまたは損傷した構成要素のターンオーバーにも関与します。さらに、クリステ構造や分裂・融合バランスに影響する因子のプロセシングを通じてミトコンドリアダイナミクスにも関与し、その活性は生体エネルギー恒常性や活性酸素種（ROS）の制御と結び付いています。遺伝学的研究では、YME1L1 機能の変化がミトコンドリア機能不全の表現型や、神経発達性／神経筋疾患の機序と関連付けられており、ミトコンドリアの品質管理異常をモデル化する上で重要です。

YME1L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるYME1L1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、YME1L1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、YME1L1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、YME1L1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、YME1L1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、YME1L1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• YME1L1の機能に不可欠なYME1L1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、YME1L1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• YME1L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびYME1L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、YME1L1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  YME1L1 HDRプラスミド（h）および YME1L1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはYME1L1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のYME1L1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。