Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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YAP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400040-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- YAPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase YAP (h) e o Plasmídeo Double Nickase YAP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para YAP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:YAP Anticorpo (G-6): sc-376830
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
YAP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400040-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
YAP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400040-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YAP1 codifica o coativador transcricional YAP, um efetor central da via de sinalização Hippo que integra densidade celular, sinais mecânicos e polaridade para controlar proliferação, apoptose e o tamanho dos órgãos. Quando as quinases Hippo estão inativas, o YAP se acumula no núcleo e se associa a fatores de transcrição da família TEAD para regular programas gênicos ligados ao crescimento, à remodelação do citoesqueleto e à sinalização da matriz extracelular. A atividade desregulada de YAP está implicada em inibição de contato alterada, dinâmicas epitélio–mesênquima e fenótipos semelhantes aos de células-tronco, sendo frequentemente estudada em biologia do câncer, fibrose e processos regenerativos. O YAP também interage com as vias de sinalização de GPCR, Wnt/β-catenina e TGF-β, tornando o YAP1 um nó útil para mapear a comunicação entre vias e a reprogramação de redes transcricionais.
YAP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus YAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de YAP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função YAP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com YAP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.