Wnt-4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423717

개요

Wnt4는 분비형 신호 리간드인 Wnt-4를 암호화하며, 배아 발생과 성체 조직 항상성을 형성하는 WNT 경로 활성의 핵심 조절자입니다. 마우스에서 Wnt-4는 상황(맥락)에 따라 정준적 β-카테닌 신호전달과 비정준 WNT 경로를 활성화하여 세포 운명 결정, 극성, 이동, 분화에 영향을 미칩니다. 또한 생식기 및 신장 형태형성과의 강한 연관성, 골형성 및 기질(stromal) 프로그램, 그리고 하위 전사 네트워크와 세포골격 재구성 네트워크를 통해 면역 미세환경을 조절하는 기능과도 밀접히 연결되어 있습니다. Wnt-4 신호가 비정상적으로 조절되면 발생학적 표현형뿐 아니라 섬유화, 비정상 분화, 종양 관련 경로 재배선 등 질병 관련 과정과 연관되는 것으로 보고되어 왔으며, 이는 생의학 연구 모델에서 기전적 지표(리드아웃)로 활용됩니다.

Wnt-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Wnt4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Wnt4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Wnt4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Wnt-4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Wnt-4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Wnt4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Wnt-4 기능에 중요한 Wnt4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Wnt4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Wnt-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Wnt-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Wnt4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Wnt-4 HDR 플라스미드 (m) 및 Wnt-4 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Wnt4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Wnt4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.