WIPI-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411876-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WIPI-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WIPI-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase WIPI-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WIPI2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WIPI-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411876-NIC | 20 µg | $410.00 |
WIPI2 codifica a WIPI-2, uma proteína da família PROPPIN que se liga ao fosfatidilinositol 3-fosfato e atua como um arcabouço inicial na macroautofagia. A WIPI-2 recruta e organiza o complexo ATG12–ATG5–ATG16L1 para promover a lipidação de LC3 e a expansão da membrana do autofagossomo a jusante da sinalização da PI3K de classe III. Por meio dessas funções, a WIPI-2 contribui para a proteostase, o controle de qualidade de organelas e a adaptação celular ao estresse por privação de nutrientes. A autofagia dependente de WIPI2 desregulada tem sido estudada em contextos que incluem neurodegeneração, biologia de infecções e metabolismo de células tumorais, nos quais alterações no fluxo autofágico podem influenciar a sobrevivência e a sinalização inflamatória.
WIPI-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WIPI2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WIPI2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WIPI2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WIPI2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.