Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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WIPI-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405215
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- WIPI-1 CRISPR/Cas9 녹아웃(KO) 플라스미드 (h)은 플라스미드 풀로, 각 플라스미드는 Cas9 뉴클레아제와 표적 특이적 20nt 가이드 RNA(gRNA)를 암호화하며, GeCKO v2 라이브러리에서 유래한 서열을 사용하여 녹아웃 효율을 극대화하도록 설계되었습니다.
- gRNA 서열은 Cas9가 WIPI-1 게놈 위치에서 부위 특이적 이중 가닥 절단(DSBs)을 유도하도록 유도하며, 이는 비동종 말단 결합(NHEJ)을 통해 유전자 녹아웃을 초래합니다
- 푸로마이신 내성 및 RFP 유전자는 LoxP 사이트로 둘러싸여 있어, 안정적인 녹아웃 세포주를 확립한 후 Cre 재조합효소(Cre 벡터: sc-418923)를 통해 선택 마커를 제거할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 WIPI-1 Antibody (F-6): sc-376205
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
WIPI-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h) | sc-405215 | 20 µg | $397.00 |
개요
WIPI1은 자가포좀 생합성 과정에서 class III PI3K 복합체의 핵심 효과인자로 작용하는, 포스파티딜이노시톨 3-인산(PI3P) 결합 WD-반복 단백질인 WIPI-1을 암호화합니다. WIPI-1은 초기 자가포식 단계에서 새로 형성되는 파고포어(phagophore)에 하위 ATG 기계를 모집하고, 자가포좀 성숙에 필요한 막 재형성을 지원함으로써 자가포식의 초기 사건에 관여합니다. 자가포식 및 세포 스트레스 적응에서의 역할을 통해 WIPI-1은 단백질 항상성(proteostasis), 소기관 품질 관리, 영양분 신호전달을 조절하는 경로와 관련이 있습니다. WIPI 계열 단백질을 포함한 자가포식 구성요소의 조절 이상은 실험 모델에서 종양 세포 생존 변화, 신경퇴행성 과정, 염증성 신호전달과 연관되어 왔습니다.
WIPI-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 WIPI1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 WIPI1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.
다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 WIPI1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 WIPI-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.
이 CRISPR 녹아웃 시스템은 WIPI-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 WIPI1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.
주요 특징
- WIPI-1 기능에 중요한 WIPI1 엑손을 표적하는 sgRNA
전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
녹아웃 효율 향상을 위해 여러 WIPI1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
형질전환을 통한 전달과 호환
설계 변형
CRISPRs +/- HDR
- WIPI-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 WIPI-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 WIPI1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
WIPI-1 HDR 플라스미드 (h) 및 WIPI-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 WIPI1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 WIPI1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.