WDR17 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414101

Visão geral

WDR17 (domínio de repetição WD 17) codifica uma proteína prevista contendo repetições WD40, que se acredita atuar como um arcabouço (scaffold) para a montagem de complexos multiproteicos, sustentando interações proteína–proteína reguladas no citoplasma e em locais associados à membrana. Embora seus parceiros moleculares ainda não estejam completamente definidos, proteínas com repetições WD comumente influenciam o tráfego intracelular, a organização do citoesqueleto e a integração de sinais ao coordenar a ubiquitinação e outros mecanismos de controle pós-traducionais. A expressão e a variação genética em WDR17 têm sido investigadas no contexto de fenótipos sensoriais e do neurodesenvolvimento, em consonância com papéis de scaffolds de repetição WD na arquitetura celular especializada e em vias de homeostase. Essas características tornam WDR17 um alvo útil para dissecar a organização de vias em células humanas, nas quais proteínas de scaffold modulam a localização e a estabilidade de componentes de sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO WDR17 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WDR17 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WDR17, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WDR17 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína WDR17.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WDR17 para a investigação da sinalização de WDR17, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WDR17 críticos para a função WDR17
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WDR17 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo WDR17 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo WDR17 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WDR17. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo WDR17 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR WDR17 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WDR17 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WDR17 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.