WASP 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400712-NIC

WAS 유전자는 Wiskott–Aldrich 증후군 단백질(WASP)을 암호화하며, WASP는 조혈계 세포에 특이적으로 발현되는 액틴 세포골격 재구성 조절자로서 수용체 신호전달을 Arp2/3 의존적 가지친 액틴 중합과 연결한다. WASP는 Cdc42, 포스포이노시타이드, 그리고 SH3 도메인 어댑터와의 상호작용을 통해 백혈구에서 면역 시냅스 형성, 세포 이동, 식작용, 그리고 엔도사이토시스성 수송을 조정한다. WASP 활성은 T 세포 수용체, B 세포 수용체, Fc 수용체, 케모카인 수용체 하위 경로를 통합하여 림프구 활성화와 선천면역 반응을 형성한다. WAS 기능의 이상 조절은 면역결핍 및 혈소판 생물학의 변화와 연관되어 있어, 인간 면역세포에서 세포골격 조절 기전을 연구하는 데 중요한 표적이 된다.

WASP 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 WAS 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 WAS 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 WAS의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, WAS 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.