WASP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423693

개요

마우스 Was 유전자는 위스코트–올드리치 증후군 단백질(WASP)을 암호화한다. WASP는 조혈계 특이적으로 발현되는 액틴 세포골격 리모델링 조절자로, 수용체 근접 신호전달을 Arp2/3에 의해 유도되는 가지형(분지형) 액틴 중합과 연결한다. WASP는 Rho 계열 GTPase와 포스포이노시타이드 신호전달로부터의 입력을 통합하여 면역세포의 이동, 부착, 식작용, 면역 시냅스 조직화를 조율한다. 이러한 기능을 통해 WASP는 면역 수용체 하류의 엔도사이토시스, 소포성 수송, 전사 반응과 같은 과정에도 영향을 미친다. WASP 활성의 조절 이상은 면역 기능 이상 표현형과 연관되며, 백혈구 생물학에서 세포골격 의존적 신호전달을 연구하기 위한 기전적 단서를 제공한다.

WASP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Was 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Was 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Was의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 WASP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 WASP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Was 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• WASP 기능에 중요한 Was 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Was 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• WASP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 WASP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Was 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  WASP HDR 플라스미드 (m) 및 WASP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Was 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Was 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.