Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
VPS39 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404507-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VPS39O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VPS39 (h) e o Plasmídeo Double Nickase VPS39 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VPS39. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VPS39 Anticorpo (C-5): sc-514762
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VPS39 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404507-NIC | 20 µg | $410.00 |
VPS39 codifica uma subunidade central do complexo de ancoragem HOPS (homotypic fusion and vacuole protein sorting), que coordena eventos de fusão entre endossomo tardio e lisossomo, bem como entre autofagossomo e lisossomo. Por meio de interações com GTPases Rab e com a maquinaria de SNAREs, VPS39 contribui para a maturação endolisossomal, a entrega de cargas aos lisossomos e a renovação (turnover) de proteínas de membrana e organelas. A disrupção do tráfego dependente de HOPS compromete a homeostase lisossomal e o fluxo autofágico, processos associados à neurodegeneração, à biologia de infecções e à adaptação ao estresse em células tumorais. Por isso, VPS39 é amplamente estudado em vias que controlam a degradação intracelular, a dinâmica de organelas e a sinalização a partir de compartimentos endolisossomais.
VPS39 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VPS39 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VPS39. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VPS39. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VPS39 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.