Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO vezatin (h): sc-418454
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- vezatin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique vezatin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: vezatin Antibody (B-1): sc-271347
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO vezatin (h) | sc-418454 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
VEZT code la vézatine, une protéine transmembranaire des jonctions cellulaires qui s’associe au complexe cadhérine–caténine et relie les jonctions d’adhérence au cytosquelette d’actine. La vézatine contribue à l’adhérence cellule–cellule des épithéliums, à l’organisation des jonctions et aux processus de mécanotransduction qui influencent l’architecture et la polarité des tissus. Par son rôle au niveau des jonctions d’adhérence, VEZT s’inscrit à l’interface de voies régulant la dynamique du cytosquelette et la signalisation dépendante du contact. Des altérations de l’expression de VEZT ou un remodelage des jonctions ont été étudiés dans des contextes de dysfonction épithéliale et de modifications liées au cancer affectant l’adhérence et l’invasivité.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO vezatin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène VEZT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du VEZT, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert VEZT à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine vezatin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en VEZT pour l'étude de la signalisation de vezatin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de VEZT essentiels à la fonction de vezatin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de VEZT pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le vezatin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le vezatin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus VEZT. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le vezatin plasmide HDR (h) et le vezatin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie VEZT pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles VEZT définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.