VEGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423666
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VEGF-B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico VEGF-B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VEGF-B Anticorpo (RM0008-6E72): sc-101582
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VEGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423666 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Vegfb codifica o fator de crescimento endotelial vascular B (VEGF-B), um ligante secretado da família VEGF que sinaliza principalmente por meio do VEGFR1 (FLT1) e das neuropilinas para modular o comportamento das células endoteliais e a homeostase vascular. Em contraste com o VEGF-A, fortemente angiogênico, o VEGF-B é frequentemente associado à sobrevivência endotelial, à estabilização dos vasos e à regulação da captação e do metabolismo de lipídios em tecidos com alta demanda oxidativa. A sinalização dependente de VEGF-B se cruza com as vias PI3K–AKT e MAPK e pode influenciar a função mitocondrial e programas de transporte de ácidos graxos. Alterações na atividade do VEGF-B têm sido estudadas em contextos de estresse metabólico e biologia cardiovascular, incluindo disfunção vascular e a suscetibilidade dos tecidos a lesão isquêmica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VEGF-B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vegfb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vegfb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vegfb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VEGF-B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vegfb para a investigação da sinalização de VEGF-B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vegfb críticos para a função VEGF-B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vegfb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo VEGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo VEGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vegfb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo VEGF-B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR VEGF-B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vegfb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vegfb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.