VCX-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416596

Visão geral

VCX3B codifica a VCX-C, um membro da família de proteínas VCX/Y, enriquecida em tecidos da linhagem germinativa masculina e associada a programas de transcrição específicos do testículo. As proteínas dessa família estão implicadas na regulação do processamento de mRNA e no controle pós-transcricional durante a espermatogênese, vinculando a VCX-C a processos como metabolismo de RNA e diferenciação de células germinativas. VCX3B localiza-se em uma região do cromossomo X recorrentemente envolvida em variações no número de cópias, o que a torna relevante para estudos de sensibilidade à dosagem e estabilidade do genoma. A desregulação de genes da família VCX tem sido investigada no contexto de fenótipos de infertilidade masculina e rearranjos genômicos ligados ao X, sustentando investigações mecanísticas em modelos de biologia reprodutiva e do desenvolvimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VCX-C (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene VCX3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do VCX3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do VCX3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VCX-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de VCX3B para a investigação da sinalização de VCX-C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) VCX3B críticos para a função VCX-C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos VCX3B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo VCX-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo VCX-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus VCX3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo VCX-C Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR VCX-C (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia VCX3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo VCX3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.