vanin-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406512

개요

VNN1은 vanin-1을 암호화하며, vanin-1은 GPI로 막에 고정된 외부효소(ectoenzyme)로서 판테테이나아제(pantetheinase) 활성을 가지고 판테테인을 가수분해해 시스테아민과 판토텐산을 생성함으로써 보조효소 A(CoA) 대사를 산화환원 조절과 연결합니다. 시스테아민/시스타민 균형의 조절과 그에 따른 글루타티온 항상성에 대한 하위 영향들을 통해, vanin-1은 산화 스트레스, 염증, 조직 손상에 대한 세포 반응에 영향을 미칩니다. VNN1 발현은 상피 및 면역 관련 환경에서 두드러지며, 이때 백혈구 유입(recruitment)과 장벽(barrier) 관련 염증성 신호전달을 형성하는 데 관여할 수 있습니다. VNN1/vanin-1 활성의 이상 조절은 염증성 및 대사성 질환 상태와 연관되어 있어, 스트레스 반응성 경로를 연구하는 데 유용한 표적 노드로 여겨집니다.

vanin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 VNN1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 VNN1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 VNN1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 vanin-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 vanin-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 VNN1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• vanin-1 기능에 중요한 VNN1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 VNN1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• vanin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 vanin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 VNN1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  vanin-1 HDR 플라스미드 (h) 및 vanin-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 VNN1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 VNN1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.