VAChT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401240

개요

SLC18A3는 소포성 아세틸콜린 수송체(VAChT)를 암호화하며, VAChT는 소포의 양성자 전기화학적 기울기를 이용해 아세틸콜린을 분비 소포(시냅스 소포) 안으로 적재하는 시냅스 소포 막 단백질이다. 이러한 소포 포장 단계는 신경근 접합부와 중추 및 말초의 콜린성 회로에서 양자적(quantal) 콜린성 신경전달에 필수적이다. VAChT 기능은 아세틸콜린의 합성과 재활용 경로와 맞물려, 시냅스 전 말단의 소포 순환을 조절된 엑소사이토시스 및 시냅스 신호 전달과 연결한다. 아세틸콜린 저장 장애로 인한 콜린성 톤의 변화는 신경발달 및 신경퇴행성 표현형, 자율신경 기능장애, 그리고 운동 조절과 인지에 영향을 미치는 질환과 연관되어 왔다.

VAChT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SLC18A3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SLC18A3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SLC18A3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 VAChT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 VAChT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SLC18A3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• VAChT 기능에 중요한 SLC18A3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SLC18A3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• VAChT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 VAChT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SLC18A3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  VAChT HDR 플라스미드 (h) 및 VAChT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SLC18A3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SLC18A3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.