UPIb CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423620

개요

Upk1b는 분화된 요로상피 우산세포(umbrella cell)의 비대칭 단위막(asymmetric unit membrane) 플라크를 형성하기 위해 다른 유로플라킨들과 함께 조립되는, 테트라스파닌 유사 막단백질인 유로플라킨 Ib(UPIb)를 암호화합니다. 이러한 플라크는 정단막(apical membrane)의 구조적 조직화, 장벽 무결성, 그리고 방광이 늘어나거나 배뇨할 때 표면 리모델링을 조절하는 소낭 수송(vesicle trafficking) 과정들을 지지합니다. UPIb는 상피 분화 프로그램과 막 미세영역(membrane microdomain) 조직화에 관여하며, 세포골격 구조를 접합부 및 표면 단백질의 안정성과 연결합니다. 유로플라킨 발현 양상의 변화는 요로상피 상태를 나타내는 지표로 널리 활용되며, 장벽 기능 이상, 염증, 요로상피의 형질전환(종양화) 관련 연구와도 연관성이 있습니다.

UPIb CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Upk1b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Upk1b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Upk1b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UPIb 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UPIb 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Upk1b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UPIb 기능에 중요한 Upk1b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Upk1b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UPIb CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UPIb CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Upk1b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UPIb HDR 플라스미드 (m) 및 UPIb HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Upk1b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Upk1b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.