UNC5H1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405369

개요

UNC5A는 리간드 의존적 신호전달을 통해 축삭의 경로 탐색과 뉴런의 위치 결정을 유도하는 막관통성 유도(가이던스) 분자인 네트린 수용체 UNC5H1을 암호화합니다. UNC5H1은 네트린-1 매개 유인/회피 신호의 통합에 관여하며, 하위의 Rho 계열 GTPase 및 MAPK 연계 경로를 통해 세포골격 역학, 접착, 이동성 행동에 영향을 줄 수 있습니다. 신경발달을 넘어, UNC5H1 관련 신호는 아폽토시스 조절과 상피–간엽 전이(EMT) 유사 세포 프로그램의 조절과도 연관되어 있어, 조직 패터닝과 항상성 유지에서의 역할을 뒷받침합니다. UNC5A/UNC5H1의 발현 이상 또는 경로 결합의 변화는 신경발달장애와 암 생물학 연구에서 보고되어 왔으며, 이때 UNC5H1은 유도 신호와 생존 신호 간 크로스토크를 탐구하기 위한 기전적 결절점으로 활용됩니다.

UNC5H1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 UNC5A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 UNC5A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 UNC5A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UNC5H1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UNC5H1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 UNC5A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UNC5H1 기능에 중요한 UNC5A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 UNC5A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UNC5H1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 UNC5H1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 UNC5A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UNC5H1 HDR 플라스미드 (h) 및 UNC5H1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 UNC5A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 UNC5A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.