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UNC45A慢病毒激活颗粒(m) | sc-430401-LAC | 200 µl | $455.00 |
Unc45a 编码 UNC45A,这是一种含 UCS 结构域的肌球蛋白伴侣蛋白,可与 HSP90 协同作用,促进非肌肉肌球蛋白的正确折叠、稳定以及功能性循环。通过调控肌动蛋白-肌球蛋白(actomyosin)动力学,UNC45A 维持细胞骨架组织、囊泡运输和细胞迁移,并与胞质分裂和上皮极性等过程相关。UNC45A 活性异常会扰乱蛋白质稳态以及依赖收缩力的信号通路,进而影响组织稳态与应激反应。这些功能使小鼠 UNC45A 成为研究细胞骨架相关表型机制,以及影响增殖与迁移行为的基因网络的一个重要靶标。
UNC45A 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Unc45a 表达。
UNC45A 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Unc45a转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性UNC45A表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Unc45a 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。