UDP-GlcDH CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423601

개요

마우스 Ugdh는 UDP-글루코스 6-탈수소효소(UDP-GlcDH)를 암호화하며, 이는 세포질에 존재하는 효소로 UDP-글루코스를 산화하여 UDP-글루쿠론산을 생성합니다. UDP-글루쿠론산은 글리코사미노글리칸과 프로테오글리칸 생합성의 핵심 전구체입니다. 이 반응은 히알루로난 및 콘드로이틴/더마탄 황산 생산에 필요한 기질을 공급함으로써 세포외기질의 조립과 재형성을 뒷받침하며, 그 결과 세포 부착, 이동, 조직 형태형성에 영향을 미칩니다. 또한 Ugdh 활성은 탄수화물 대사를 UDP-당 상호전환 경로와 연결하여 글리코칼릭스 조성과 세포–세포 신호전달을 형성하는 데 기여합니다. 실험 모델에서는 UDP-글루쿠론산의 가용성과 기질(매트릭스) 당화가 비정상적으로 조절될 경우 발달 프로그램의 변화, 섬유화 유사 기질 변화, 암 관련 침윤 표현형과 연관되는 것으로 보고되었습니다.

UDP-GlcDH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ugdh 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ugdh 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ugdh의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UDP-GlcDH 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UDP-GlcDH 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ugdh 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UDP-GlcDH 기능에 중요한 Ugdh 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ugdh 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UDP-GlcDH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UDP-GlcDH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ugdh 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UDP-GlcDH HDR 플라스미드 (m) 및 UDP-GlcDH HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ugdh 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ugdh 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.