UBXN2B Plasmide Double Nickase (h): sc-407871-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UBXN2B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UBXN2B Double Nickase Plasmid (h) e il UBXN2B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UBXN2B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UBXN2B Plasmide Double Nickase (h) | sc-407871-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBXN2B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407871-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBXN2B (proteina 2B contenente un dominio UBX, regolatore dell’ubiquitina) è un adattatore con dominio UBX implicato nel controllo di qualità delle proteine dipendente dall’ubiquitina e nel rimodellamento dei complessi proteici. Attraverso interazioni con ATPasi AAA come VCP/p97, UBXN2B è in grado di influenzare la degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD), la proteostasi e la segnalazione adattativa allo stress legata all’eliminazione delle proteine mal ripiegate. Questi processi si intrecciano con la regolazione del ciclo cellulare, l’apoptosi e le risposte infiammatorie, rendendo UBXN2B un nodo rilevante per lo studio di vie alterate nella neurodegenerazione, nella biologia del cancro e in altri disturbi associati alla proteostasi. La perturbazione funzionale di UBXN2B nell’uomo può quindi essere utilizzata per chiarire come il turnover mediato dall’ubiquitina plasmi le reti di segnalazione e l’omeostasi cellulare.
UBXN2B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UBXN2B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UBXN2B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UBXN2B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UBXN2B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.