UBE1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402844

개요

UBA1는 유비퀴틴 유사 수식자 활성화 효소 1(UBE1), 즉 ATP 의존적 유비퀴틴 활성화를 개시하고 유비퀴틴을 E2 결합(컨주게이팅) 효소로 전달하여 유비퀴틴–프로테아좀 시스템 기능을 구동하는 E1 효소를 암호화합니다. 이러한 상위 조절 지점을 통해 UBE1은 전반적인 단백질 턴오버, 단백질 항상성(프로테오스타시스), 스트레스 반응에 영향을 미치며, 세포주기 진행, DNA 손상 신호전달, 선천면역 경로 조절과 같은 과정에도 관여합니다. UBA1 활성의 교란은 유비퀴틴 의존적 신호 네트워크를 재구성하고 핵심 조절 단백질의 안정성을 변화시킬 수 있어, 신경퇴행성 질환, 암에서의 프로테오스타시스 의존성, 그리고 척수성 근위축증을 포함한 X-연관 질환 연구와 관련성이 있습니다. UBE1은 유비퀴틴화 과정의 정점에 위치하므로, 유전적 교란은 세포 항상성에 대한 유비퀴틴 경로의 기여를 규명하는 직접적인 접근법을 제공합니다.

UBE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 UBA1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 UBA1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 UBA1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UBE1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UBE1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 UBA1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UBE1 기능에 중요한 UBA1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 UBA1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UBE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 UBE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 UBA1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UBE1 HDR 플라스미드 (h) 및 UBE1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 UBA1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 UBA1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.