Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
UBC12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423575
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UBC12 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UBC12, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UBC12 Anticorpo (D-4): sc-390064
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UBC12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423575 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ube2m codifica a UBC12, uma enzima conjugadora E2 que transfere NEDD8 para as proteínas cullin, permitindo a ativação das ligases de ubiquitina do tipo cullin–RING (CRLs) e um amplo controle da proteostase. Por meio da regulação da ubiquitinação dependente de CRLs, a UBC12 influencia a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA, a transdução de sinais e a adaptação ao estresse, ao modular a degradação de proteínas regulatórias essenciais. A perturbação da neddilação pode desorganizar a homeostase proteica e o controle de checkpoints, conectando a função de Ube2m/UBC12 a vias frequentemente investigadas em biologia do câncer, neurobiologia e sinalização inflamatória. Em sistemas murinos, estudos de perda de função de Ube2m dão suporte à dissecação mecanística de redes de modificações por proteínas do tipo ubiquitina e de suas contribuições para o desenvolvimento tecidual e para fenótipos relevantes a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UBC12 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ube2m em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ube2m, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ube2m na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UBC12.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ube2m para a investigação da sinalização de UBC12, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ube2m críticos para a função UBC12
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ube2m para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UBC12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UBC12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ube2m. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UBC12 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UBC12 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ube2m para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ube2m definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.