UBC CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418924

개요

마우스 Ubc는 유비퀴틴–프로테아좀 시스템에 의한 ATP 의존적 단백질 분해(턴오버)에 필요한 유비퀴틴 단량체의 주요 공급원인 폴리유비퀴틴-C(UBC)를 암호화한다. UBC는 핵심 경로 구성요소의 안정성과 활성을 조절함으로써 유비퀴틴화에 의해 구동되는 세포 주기 진행, DNA 손상 반응, 스트레스 적응, 염증성 신호전달의 조절을 뒷받침한다. 유비퀴틴 항상성은 단백질 독성 스트레스(proteotoxic stress)를 완충하고 신호전달의 출력 형태를 좌우하므로, 유비퀴틴 공급의 변화와 단백질 항상성(proteostasis) 불균형은 신경퇴행, 암 관련 성장 조절, 면역 조절 이상 모델에서 자주 분석된다. 따라서 Ubc는 마우스 세포에서 프로테아좀 의존적 품질 관리, 유비퀴틴 사슬(체인) 동역학, 그리고 자가포식 및 스트레스 반응 경로와의 상호작용을 규명하는 데 흔히 사용된다.

UBC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ubc 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ubc 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ubc의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UBC 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UBC 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ubc 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UBC 기능에 중요한 Ubc 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ubc 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UBC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UBC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ubc 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UBC HDR 플라스미드 (m) 및 UBC HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ubc 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ubc 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.