U2AF65 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423572

개요

U2af2는 3′ 스플라이스 부위의 폴리피리미딘 트랙트를 인식하는 U2 보조 인자(U2 auxiliary factor)의 핵심 RNA 결합 구성요소인 U2AF65를 암호화하며, 초기 스플라이소솜 조립 과정에서 U2AF35와 협력해 U2 snRNP의 모집을 돕습니다. U2AF65는 스플라이스 부위 선택을 엑손 정의(exon definition)와 연결함으로써 세포 주기 진행, 분화, 스트레스 반응을 조절하는 전반적인 대체 스플라이싱 프로그램 형성에 기여합니다. U2AF65 의존적 스플라이싱이 교란되면 DNA 손상 반응과 세포사멸을 조절하는 경로에서 아이소폼 균형이 바뀔 수 있어, U2af2는 RNA 처리에 의해 유도되는 표현형을 분석하는 데 유용한 결절점이 됩니다. 스플라이스 부위 인식의 이상과 U2AF 복합체 활성 변화는 발생 이상 및 암 관련 전사체 재구성의 기저 메커니즘과 폭넓게 연관됩니다.

U2AF65 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 U2af2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 U2af2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 U2af2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 U2AF65 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 U2AF65 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 U2af2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• U2AF65 기능에 중요한 U2af2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 U2af2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• U2AF65 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 U2AF65 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 U2af2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  U2AF65 HDR 플라스미드 (m) 및 U2AF65 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 U2af2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 U2af2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.