twist2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419989

개요

Twist2는 기본 나선–고리–나선(bHLH) 전사인자를 암호화하며, 간엽 계통 프로그램을 조절함으로써 배아 발생과 조직 항상성 동안 세포 운명 결정, 증식, 분화를 제어합니다. 마우스에서 twist2는 상피–간엽 전이(EMT) 유사 과정, 세포외기질 리모델링, 그리고 형태형성과 기질(stromal) 세포 거동을 형성하는 TGF-β 및 Wnt 같은 경로와의 상호작용과 연결된 전사 네트워크에 영향을 줍니다. TWIST2 활성의 변화는 발달 이상 및 염증·섬유화 반응의 조절 이상과 연관되어 있어, 결합조직 생물학에서 유전자 조절 회로를 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다. 기능 상실 모델은 Twist2가 섬유아세포, 근육형성 전구세포, 면역 관련 기질 구획에서 전사 억제/활성화 프로그램을 어떻게 조율하는지 조사하는 데 도움을 줍니다.

twist2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Twist2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Twist2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Twist2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 twist2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 twist2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Twist2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• twist2 기능에 중요한 Twist2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Twist2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• twist2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 twist2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Twist2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  twist2 HDR 플라스미드 (m) 및 twist2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Twist2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Twist2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.