Tuba CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406569

개요

DNMBP는 막 신호전달을 액틴 및 미세소관 세포골격 재구성과 연결하는 다중 도메인의 Rho 구아닌 뉴클레오타이드 교환인자(GEF)인 Tuba를 암호화합니다. Tuba는 CDC42와 같은 소형 GTPase의 활성화와 엔도사이토시스 및 접합 복합체와의 협력을 통해 세포 극성, 소낭 수송, 부착연접(adherens junction)과 밀착연접(tight junction)의 재구성을 조절하는 데 기여합니다. 이러한 기능은 DNMBP를 상피 조직화, 신경돌기(neurite) 신장, 이동 의존적 형태형성과 같은 과정을 제어하는 경로에 위치시킵니다. Tuba가 관여하는 세포골격 신호 및 극성 네트워크의 조절 이상은 비정상적인 세포 침윤과 신경발달 관련 표현형의 맥락에서 시사된 바 있으며, 이는 질병 관련 세포 구조를 기전적으로 연구하는 데 DNMBP가 유용함을 뒷받침합니다.

Tuba CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DNMBP 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DNMBP 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DNMBP의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Tuba 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Tuba 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DNMBP 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Tuba 기능에 중요한 DNMBP 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DNMBP 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Tuba CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Tuba CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DNMBP 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Tuba HDR 플라스미드 (h) 및 Tuba HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DNMBP 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DNMBP 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.