TTC7A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412780
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TTC7A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TTC7A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TTC7A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-412780 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O TTC7A codifica uma proteína contendo repetições de tetratricopeptídeo, implicada na organização de complexos multiproteicos que sustentam a polaridade epitelial e a homeostase do citoesqueleto. Estudos relacionam o TTC7A a sinalizações associadas a fosfoinositídeos e a processos de tráfego de membrana que influenciam a adesão celular, a dinâmica da actina e a integridade do epitélio intestinal. Variantes com perda de função têm sido associadas a fenótipos intestinais e imunológicos graves de início precoce, tornando o TTC7A um ponto de entrada útil para dissecar mecanismos de disfunção da barreira epitelial e desregulação imune. Em modelos de células humanas, a perturbação de TTC7A pode ajudar a investigar o crosstalk entre organização de membrana, respostas ao estresse e programas de diferenciação específicos de linhagem.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TTC7A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TTC7A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TTC7A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TTC7A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TTC7A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TTC7A para a investigação da sinalização de TTC7A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TTC7A críticos para a função TTC7A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TTC7A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TTC7A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TTC7A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TTC7A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TTC7A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TTC7A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TTC7A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TTC7A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.