TSPO2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406342

Übersicht

TSPO2 (Translokatorprotein 2) ist ein mitochondrienassoziiertes Mitglied der TSPO-Familie, das vorwiegend in Zellen der erythroiden Linie exprimiert wird, wo es die terminale Erythropoese und die Reifung roter Blutkörperchen unterstützt. Es wird mit der Regulation der Organisation der mitochondrialen Membran sowie dem Umgang mit Metaboliten/Porphyrinen in Verbindung gebracht, wodurch die TSPO2-Aktivität mit der Hämsynthese und Programmen der erythroiden Differenzierung verknüpft ist. Über diese Prozesse beeinflusst TSPO2 während des Remodellings von Retikulozyten das zelluläre Redoxgleichgewicht und die mitochondriale Funktion. Veränderte TSPO2-Expression oder -Funktion wurde im Zusammenhang mit erythroiden Erkrankungen und anämieassoziierten Phänotypen untersucht, was TSPO2 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien in hämatopoetischen Systemen macht.

Das TSPO2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TSPO2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TSPO2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TSPO2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TSPO2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TSPO2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TSPO2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TSPO2-Exone abzielen, die für die TSPO2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TSPO2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TSPO2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TSPO2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TSPO2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TSPO2 HDR-Plasmid (h) und TSPO2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TSPO2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TSPO2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.