TSPAN18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405937

Visão geral

TSPAN18 codifica uma proteína de membrana da família das tetraspaninas que ajuda a organizar microdomínios enriquecidos em tetraspaninas, coordenando interações laterais entre recetores, moléculas de adesão e adaptadores de sinalização na membrana plasmática. Por meio destas funções de “scaffolding”, a TSPAN18 pode influenciar processos como a comunicação célula–célula, o tráfego de membranas e a integração de sinais, que moldam programas de ativação e motilidade celular. A expressão e a variação genética nas tetraspaninas, incluindo a TSPAN18, têm sido associadas na literatura a fenótipos relacionados com plaquetas e com a biologia vascular, sustentando o uso deste alvo em estudos de sinalização associada à hemostase e de respostas inflamatórias. A dissecação da função da TSPAN18 pode esclarecer como a composição dos microdomínios de membrana modula vias a jusante relevantes para mecanismos de doença cardiovasculares e associados ao sistema imunitário.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TSPAN18 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TSPAN18 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TSPAN18, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TSPAN18 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TSPAN18.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TSPAN18 para a investigação da sinalização de TSPAN18, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TSPAN18 críticos para a função TSPAN18
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TSPAN18 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TSPAN18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TSPAN18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TSPAN18. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TSPAN18 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TSPAN18 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TSPAN18 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TSPAN18 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.