TRPC5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423516

개요

Trpc5는 수용체 작동형 및 지질 의존성 신호에 반응해 Ca²⁺ 유입을 매개하는, 일시적 수용체 전위(TRP) 정준(canonical) 계열의 비선택성 양이온 채널인 TRPC5를 암호화합니다. TRPC5는 GPCR 및 수용체 티로신 키나아제 하위의 PLC 의존성 경로에 관여하여, 막 흥분성, 세포내 칼슘 항상성, 그리고 칼슘 의존적 전사 프로그램을 조절합니다. 마우스 모델에서 TRPC5는 신경계와 혈관/내피 맥락에서 폭넓게 연구되어 왔으며, 시냅스 기능, 신경돌기 동역학, 기계감지성 반응, 산화환원(레독스) 민감성 신호전달에 영향을 미칩니다. TRPC5 활성의 이상 조절은 통증 신호전달, 불안 유사 행동, 혈관 재형성, 신장 손상 기전과 관련된 과정들과 연관되어 있으며, 신경생물학·심혈관 생물학·신장 병태생리 모델에서의 활용 근거를 뒷받침합니다.

TRPC5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Trpc5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Trpc5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Trpc5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRPC5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRPC5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Trpc5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRPC5 기능에 중요한 Trpc5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Trpc5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRPC5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TRPC5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Trpc5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRPC5 HDR 플라스미드 (m) 및 TRPC5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Trpc5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Trpc5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.