TRPC3/6/7 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403740

개요

TRPC3는 TRPC3/6/7 아계열에 속하는 Ca2+ 투과성 비선택성 양이온 채널로, 수용체에 의해 활성화되는 포스포리파아제 C(PLC) 신호를 막 탈분극 및 세포내 칼슘 유입과 연결합니다. 채널 활성은 디아실글리세롤(DAG)에 의해 조절되며, GPCR 및 수용체 티로신 키나아제 경로 하위에서의 신호를 통합해 Ca2+ 의존적 전사, 세포골격 재형성, 분비, 수축성을 형성합니다. TRPC3를 포함하는 채널 복합체는 칼시뉴린/NFAT 및 MAPK 경로와의 교차 신호를 통해 신경 흥분성과 시냅스 신호전달뿐 아니라 평활근과 심장에서의 칼슘 항상성 조절에도 기여합니다. TRPC3/6/7 축의 조절 이상은 심혈관 및 신경퇴행성 질환 환경에서의 비정상적 Ca2+ 신호와 연관되어 왔으며, 비대, 섬유화, 흥분독성 스트레스 모델에서 빈번히 연구됩니다.

TRPC3/6/7 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRPC3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRPC3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRPC3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRPC3/6/7 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRPC3/6/7 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRPC3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRPC3/6/7 기능에 중요한 TRPC3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRPC3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRPC3/6/7 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TRPC3/6/7 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRPC3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRPC3/6/7 HDR 플라스미드 (h) 및 TRPC3/6/7 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRPC3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRPC3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.