
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
TRP1 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-400412-ACT | 20 µg | $397.00 |
인간 TYRP1 유전자는 티로시나아제 관련 단백질 1(TRP1)을 암호화하며, TRP1은 색소 생성 세포에서 유멜라닌 합성과 멜라노좀 성숙을 돕는 멜라노좀 막 결합 당효소이다. TRP1은 TYR 및 DCT와 함께 멜라닌 생성 네트워크에서 기능하며, 멜라닌 중간체의 산화 화학, 멜라노좀 안정성, 그리고 MITF 신호전달과 같은 경로에 의해 조절되는 색소 침착 표현형에 영향을 준다. TYRP1 발현의 변화 또는 변이체는 색소 이상 질환과 연관되어 있으며, 멜라닌 경로 활성의 변화가 세포 스트레스 반응과 분화 상태에 영향을 줄 수 있다는 점에서 흑색종 생물학 맥락에서도 연구되어 왔다. 계통(리니지) 연관 멜라닌세포 표지자로서 TYRP1은 멜라노좀 생합성, 색소 대사, 그리고 멜라닌세포 기능을 지배하는 전사 프로그램을 연구하는 데 자주 사용된다.
TRP1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 TYRP1 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
TRP1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 TYRP1 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 TYRP1 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 TRP1 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 TYRP1 위치를 보존하고 내인성 위치에서 TRP1 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 TYRP1 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 TRP1 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.