Partículas Lentivirales de Activación (h) TROP-2: sc-402046-LAC

TACSTD2 codifica el antígeno 2 de la superficie celular del trofoblasto humano (TROP-2), una glucoproteína transmembrana de tipo I implicada en la identidad de las células epiteliales, la adhesión y la señalización proliferativa. TROP-2 puede modular el flujo intracelular de calcio e interactúa con vías vinculadas a la actividad de MAPK/ERK y PI3K–AKT, influyendo en la progresión del ciclo celular, la supervivencia y los programas de migración. La expresión alterada de TACSTD2 se asocia con frecuencia con la biología de tumores epiteliales y rasgos metastásicos, y la variación patogénica se ha relacionado con disfunción de la barrera epitelial. Como antígeno de superficie con capacidad de señalización, TROP-2 constituye un nodo útil para desentrañar el control transcripcional de los estados epiteliales y el reconfigurado de vías downstream en modelos relevantes para enfermedad.

Las partículas de activación lentiviral TROP-2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de TACSTD2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral TROP-2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción TACSTD2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TROP-2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo TACSTD2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.