Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO TRMT6 (h): sc-412224
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TRMT6 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TRMT6, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRMT6 Antibody (F-3): sc-271752
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TRMT6 (h) | sc-412224 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TRMT6 code la sous-unité catalytique du complexe tRNA (adénine(58)-N1)-méthyltransférase, qui s’associe à TRMT61A pour installer la modification conservée m1A58 dans les ARNt cytosoliques. Cette modification de l’ARN contribue à la stabilité structurale des ARNt, à la fidélité du décodage et à l’efficacité de la traduction, reliant ainsi l’activité de TRMT6 à la protéostase et aux réponses cellulaires au stress. Une perturbation de la méthylation des ARNt peut dérégler les programmes globaux de traduction et a été associée, dans plusieurs systèmes modèles, à des altérations des voies de prolifération et de maintenance du génome. TRMT6 est donc étudié dans le contexte de la régulation épitranscriptomique de l’ARN, du contrôle de la traduction et de modifications, pertinentes pour les maladies, de la croissance cellulaire et de l’adaptation au stress.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TRMT6 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TRMT6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TRMT6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TRMT6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TRMT6.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TRMT6 pour l'étude de la signalisation de TRMT6, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TRMT6 essentiels à la fonction de TRMT6
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TRMT6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TRMT6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TRMT6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TRMT6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TRMT6 plasmide HDR (h) et le TRMT6 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TRMT6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TRMT6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.