TrkB Lentiviral Activation Particles (h): sc-400142-LAC

NTRK2 kodiert die Rezeptor-Tyrosinkinase TrkB, einen hochaffinen Neurotrophinrezeptor für BDNF und NT-4/5, der das neuronale Überleben, die Differenzierung, die synaptische Plastizität und das aktivitätsabhängige Remodeling neuronaler Schaltkreise reguliert. Nach Ligandenbindung aktiviert TrkB die kanonischen Signalwege PI3K–AKT, RAS–MAPK/ERK und PLCγ–Ca2+ und koordiniert damit Transkriptionsprogramme sowie zytoskelettale Dynamiken, die das Neuritenauswachsen und die synaptische Funktion prägen. Eine fehlregulierte NTRK2/TrkB-Signalgebung wird mit veränderter Neuroentwicklung und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung gebracht; zudem wurden abnorme Rezeptoraktivität oder -expression in Krebserkrankungen untersucht, in denen Neurotrophin-Signalwege eine Rolle spielen. Als Knotenpunkt, der extrazelluläre Neurotrophin-Signale mit intrazellulärer Kinase-Signalgebung integriert, wird TrkB häufig genutzt, um Pathway-Crosstalk, neuronale Konnektivität und kontextspezifische Signalausgaben in humanen Zellmodellen zu untersuchen.

TrkB Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NTRK2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TrkB Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NTRK2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TrkB-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NTRK2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.