TRIP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423507

概要

Trip6は、LIMドメインを含むアダプタータンパク質TRIP6をコードしており、フォーカルアドヒージョンおよびアクチン細胞骨格に局在して、インテグリンシグナル伝達、細胞骨格リモデリング、転写応答を協調的に制御します。TRIP6はキナーゼやシグナル伝達複合体の足場として機能し、RhoファミリーGTPase経路やフォーカルアドヒージョンのターンオーバーを、細胞接着、スプレッディング、遊走の制御へと結び付けます。細胞骨格および核内パートナーとの相互作用を通じて、メカノトランスダクションや、細胞外マトリックスからの刺激に応答して細胞の反応を形作る遺伝子発現プログラムの調節にも寄与します。TRIP6に関連する接着・運動性ネットワークの制御異常は、疾患関連モデルにおける浸潤性表現型や組織リモデリング過程の研究において重要です。

TRIP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTrip6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Trip6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Trip6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRIP6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRIP6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Trip6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRIP6の機能に不可欠なTrip6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Trip6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRIP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTRIP6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Trip6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRIP6 HDRプラスミド（m）および TRIP6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTrip6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTrip6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。