Trio CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401231

개요

TRIO는 Rac1 및 RhoA 계열 GTPase를 활성화하는, 여러 도메인으로 이루어진 대형 Rho 구아닌 뉴클레오타이드 교환인자(GEF)인 Trio를 암호화합니다. Trio는 액틴 세포골격 재구성, 막 수송, 세포 극성을 조율하기 위해 다양한 신호를 통합합니다. 또한 세포 표면 수용체로부터의 신호를 하위 경로로 연결해 신경돌기 성장, 축삭 유도, 시냅스 조직화를 조절하며, 세포 이동과 부착에도 추가적인 역할을 합니다. TRIO 신호전달의 이상 조절과 GEF 활성에 영향을 주는 변이들은 다양한 세포 맥락에서 신경발달 관련 표현형 및 Rho GTPase 네트워크 행동 변화와 연관되어 있어, 세포골격 조절과 신호 통합을 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.

Trio CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRIO 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRIO 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRIO의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Trio 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Trio 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRIO 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Trio 기능에 중요한 TRIO 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRIO 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Trio CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Trio CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRIO 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Trio HDR 플라스미드 (h) 및 Trio HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRIO 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRIO 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.