TRIM69 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404906
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRIM69 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TRIM69, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRIM69 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404906 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TRIM69 codifica uma ligase E3 de ubiquitina da família dos motivos tripartidos (TRIM), caracterizada por domínios RING, B-box e coiled-coil, que mediam interações proteína–proteína e a sinalização dependente de ubiquitina. TRIM69 tem sido implicada na regulação da imunidade inata, incluindo a modulação de vias estimuladas por interferon e mecanismos antivirais de restrição, por meio do controle da estabilidade de substratos e de respostas transcricionais a jusante. Ao influenciar a ubiquitinação e a proteostase, TRIM69 pode moldar respostas celulares ao estresse e redes de sinalização que se cruzam com programas inflamatórios. Alterações na atividade da família TRIM são amplamente relevantes para a desregulação imune e a sinalização oncogênica, tornando TRIM69 um alvo útil para estudos mecanísticos nesses contextos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRIM69 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRIM69 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRIM69, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRIM69 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRIM69.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRIM69 para a investigação da sinalização de TRIM69, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRIM69 críticos para a função TRIM69
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRIM69 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TRIM69 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRIM69 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRIM69. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TRIM69 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRIM69 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRIM69 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRIM69 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.